科瑪嘉改良O157選擇性添加劑說(shuō)明書

科瑪嘉改良O157選擇性添加劑說(shuō)明書

大腸桿菌O157選擇性顯色培養(yǎng)基

HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified

原理

腸出血性大腸桿菌又名為產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素的大腸桿菌（VTEC/EHEC）。盡管有許多血清型大腸桿菌產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素[3]，但大腸桿菌O157:H7是導(dǎo)致人類感染的最常見(jiàn)的一種。它有幾種不常見(jiàn)的生化特性可用于鑒定。它屬于僅少數(shù)的beta葡萄糖醛酸酶（-）,24小時(shí)內(nèi)不發(fā)酵山梨醇或鼠李糖。它們可從接種到含山梨醇而非乳糖的培養(yǎng)基的糞便標(biāo)本中分離出來(lái)。

該款顯色培養(yǎng)基采用植物源蛋白胨，以取代動(dòng)物源，避免了BSE/TSE風(fēng)險(xiǎn)。它基于 Rappaport 和Henigh[1]描述的配方而成。培養(yǎng)基含山梨醇和顯色混合劑，不含乳糖和指示劑染料。顯色劑被大腸桿菌O157:H7 特異性裂解，產(chǎn)生深紫至洋紅色。普通大腸桿菌形成藍(lán)綠色菌落。

培養(yǎng)基中的HiVeg水解物和酵母粉提供碳源、氮源營(yíng)養(yǎng)和長(zhǎng)鏈氨基酸、維生素和其他生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)。氯化鈉維持滲透壓平衡。添加劑使培養(yǎng)基更具有選擇性[2]。添加劑中的亞碲酸鉀選擇性抑制氣單胞菌和普羅威登菌。添加劑中的新生霉素抑制革蘭陽(yáng)性菌。月桂基硫酸鈉抑制伴隨的革蘭陽(yáng)性菌群。

該產(chǎn)品用HiVeg植物蛋白成份替代了動(dòng)物蛋白成份，

培養(yǎng)功效*一致，且

（1）批間差異更小，

（2）增菌時(shí)由于動(dòng)物蛋白造成的干擾因素更少，

（3）避免瘋牛病（BSE /TSE）、口蹄疫等相關(guān)動(dòng)物病毒的風(fēng)險(xiǎn)，

（4）對(duì)實(shí)驗(yàn)人員及實(shí)驗(yàn)環(huán)境更安全。

此產(chǎn)品*無(wú)動(dòng)物源成份

培養(yǎng)基成分

組成g/L

HiVeg水解物5.000

酵母粉3.000

山梨醇7.000

合成離子活性劑1號(hào)1.500

月桂基硫酸鈉0.100

顯色混合劑0.250

瓊脂15.000

最終pH（25°C）6.8±0.2

配制

31.85g溶于990ml蒸餾水，加熱至沸使*溶解。高壓滅菌后，冷卻至45-50℃，無(wú)菌加入復(fù)溶的添加劑（貨號(hào):FD187，先用10ml蒸餾水復(fù)溶）。混勻并傾注平板。

質(zhì)量控制

外觀：奶油色至黃色均一自由粉末

成膠性: 牢固，與1.5%瓊脂相當(dāng)

制備好的培養(yǎng)基顏色和透明度：在平皿中為淺琥珀色，透明至輕微不透明凝膠

配比反應(yīng)：25°C下3.18% w/v水溶液，pH值為6.8±0.2

pH值要求：6.60-7.00

培養(yǎng)反應(yīng)

加入添加劑（貨號(hào):FD187）后，在35-37°C培養(yǎng)18-24小時(shí)，觀察如下：